U-2. LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DE MATERIAL DE LABORATORIO

U-2. LIMPIEZA, DESINFECCION Y ESTERILIZACION DE MATERIAL DE LABORATORIO

  • Limpieza: Eliminación física de material orgánico o partículas de los objetos. La limpieza no mata microorganismos, sino eliminarlos de los objetos.
  • Desinfección: Procedimiento por el cual se destruyen gérmenes patógenos que se encuentran en piel, mucosas, ambiente etc… La desinfección de la materia viva se llama antisepsia.
  • Esterilización: Procedimiento por el cual se destruye formas de vida microbiana incluso sus formas resistentes, como las esporas.

2.1- TIPOS DE LIMPIEZA

  • Limpieza a mano por frotación: Arrastre mecánico de la suciedad con un cepillo, escobilla, esponja, agua y detergente y posterior enjuagado con agua y/o destilada.
  • Limpieza a mano por inmersión: Colocar el material en una solución de limpieza durante 20 o 30 min. sacar y aclarar con agua y/o destilada.
  • Limpieza a máquina: Existen laboratorios con maquinaria específica para lavado de material.
  • Limpieza de Trazas: Se emplean ácidos o bases para la limpieza. Así las Trazas orgánicas (suero, sangre…) se usan lejías o disolventes orgánicos y a continuación en una solución de HC1 1N y aclarado con agua destilada.
  • Limpieza de vidrio:
    • Antes de empezar a limpiarlo:
      • En caso de material corrosivo, Vaciarlo y enjuagarlo para evitar salpicaduras
      • En caso de contaminación biológica, debe desinfectarse antes de proceder a la limpieza mediante inmersión en agua con lejía 20 – 30 min.
  • Casos Especiales:
    • Material con orgánicos resistentes: Se sumergen 24h en mezcla crómica, se enjuaga y se limpia.
    • Material con restos de tipo lipófilo: Eliminarlos con papel y someterlo a la acción de un disolvente orgánico, y después lavar con agua caliente y detergente.
    • Material con manchas de colorante: Se limpia con clorhídico 1N o mezcla crómica diluida y se enjuaga con agua destilada.
    • Material con restos de agar solidificado: Se licua previamente, se introduce al baño maría a 60º-70ºC no verter en desagües.
    • Portaobjetos: Limpiar de forma habitual, aclarar con agua destilada y se introduce en una solución de alcohol etílico o alcohol etílico-éter etílico 1:1 para desengrasarlos. Secar con paño o en estufa a 70ºC.
    • Pipetas: se enjuagan bajo el chorro y se colocan dentro de un lavador de pipetas, de no tener se meten en una probeta grande con agua y jabón con la protección de proteger el fondo con algodón. De no ser suficiente, sumergir en mezcla crómica durante 24h y enjuagar con agua destilada.
    • Pipetas cuenta glóbulos: Enjuagar con agua destilada y acetona, por último, se puede aspirar con un secador.
    • Cámara cuenta glóbulos: Se sumergen en agua destilada tibia y detergente con lejía diluida al 1/50, se enjuaga con agua destilada se seca con secador o estufa y se les pasa un papel empapado con alcohol-éter.
  • Limpieza de material diverso, aparatos y superficies
    • Material de plástico: Generalmente desechable, limpiar igual que el vidrio pero teniendo en cuenta que puede ser sensible a disolventes, ácidos y mezclas crómicas.
    • Material óptico: Las lentes se limpian con cuidado con papel para lentes, no usar otros materiales por riesgo de rayar, una vez por semana pasar un papel de lente empapado en xilol.
    • Material eléctrico: Desenchufar, con un paño húmedo o con agua jabonosa o un algodón humedecido en alcohol.
    • Superficies: Deberán estar cubiertas con papel de filtro que actúa como aislante biológico. Se limpiaran con un paño empapado en una solución de lejía diluida.

3.- DESINFECCION Y ESTIRILIZACION

Microorganismo o gérmenes: Organismos muy pequeños visibles sólo con la ayuda de un microscopio. (Bacterias, virus, hongos y parásitos)

Microorganismo patógeno: El que cuando está en el organismo causa una enfermedad o infección. Se dice Infectante si se halla sobre otro material.

Microorganismos saprófitos: Son aquellos que se albergan en el organismo, sin producir enfermedad.

Desinfección: Técnica de saneamiento, utilizando diversos medios cuya misión es la destrucción de gérmenes patógenos causantes de enfermedades.

Esterilización: Técnica de saneamiento que destruye gérmenes patógenos, saprófitos y esporas, es decir, todo microorganismo vivo que se encuentre en el objeto.

Material séptico: Material contaminado con gérmenes patógenos y saprofitos

Material aséptico: Material estéril  libre de todo germen.

Antisepsia: Cuando la desinfección es sobre tejidos vivos.

3.2.- METODOS DE DESINFECCIÓN.

3.2.1.- Métodos físicos

  • Ebullición o hervido: Sumergir el material en agua a 100ºC durante 30 min. Elimina la mayoría de los patógenos pero no elimina esporas.
  • Rayos ultravioletas: Impiden la reproducción de gérmenes patógenos.  Se usan en la reducción de microorganismos en zonas estériles para envases y campanas de flujo laminar (Zonas de Microbiología y preparación IV y nutrición parenteral)

3.2.2.- Métodos químicos.

  • Desinfectantes de alto nivel: Elimina la mayoría de gérmenes incluidos virus y esporas.
  • Desinfectantes de grado medio: Igual que el anterior pero no elimina virus ni esporas.
  • Desinfectantes de bajo poder: Solo elimina gérmenes patógenos.

La mayoría de los desinfectantes son productos de síntesis y deben tener estas propiedades:

  • Poder germicida lo mas alto posible y de amplio espectro a bajas concentraciones
  • No ser toxico para el hombre, animales y plantas, ni corrosivo para el material.
  • Poseer alto poder de penetración, soluble al agua y fluidos celulares.
  • Económico y de fácil adquisición.
  • Inerte al material a tratar
  • Estabilidad y homogeneidad de composición y difusión.

3.2.3.- Desinfectantes de uso frecuente:

  • Alcohol etílico de 70º y de isopropílico: nivel medio (piel, instrumentos y superficies)
  • Peróxido de Hidrógeno o agua oxigenada:  según concentración puede ser de nivel bajo (3%) o nivel alto (30%) o antiséptico.
  • Glutaraldehído al 2%: Desinfectante de alto nivel
  • Compuestos clorados: Al disolverse en agua liberan cloro y tiene acción desinfectante. De nivel medio.
  • Derivados del amonio cuaternario: De bajo nivel, detergentes para limpiar y se suelen emplear con otros desinfectantes.  Tienen un efecto antiséptico sobre la piel.
  • Compuestos Fenólicos: Efectivos a bajas concentraciones contra formas vegetativas de bacterias pero no contra esporas.

3.2.4.- Métodos de desinfección.

  • Inmersión: Sumergir los materiales en desinfectante
  • Loción: Empapar bayetas, esponjas o fregonas y frotar con ellas.
  • Pulverización: Proyectar finas gotas sobre superficies.

3.3.- Métodos de esterilización.

  • Físicos:
    • Térmicos.
      • Térmicos por calor seco (Horno Pasteur)
      • Térmicos por calor directo
        • Flameado
        • Incineración
      • Térmicos por calor Húmedo (Autoclave)
    • No Térmicos
      • Filtros de membrana
  • Químicos:
    • Óxido de etileno (muy tóxico)
    • Aldehídos

3.4.- Control de calidad de la esterilización.

3.4.1.- Control del proceso

  • Físicos: Se efectúan mediante indicadores gráficos de presión y temperatura.
  • Químicos:
    • Tiras reactivas: impregnadas de un compuesto que cambia de color
    • Tubos de Brown
  • Biológicos (test de esporas): Mediante cultivo y un indicador de pH